S-nitrosoglutathione (GSNO) is an endogenous donor of nitric oxide (NO), which, at the same time, can act both as a signaling molecule and a toxic agent, forming active forms of nitrogen. The purpose of this work was to study the mechanism of NO participation in the regulation of erythroid nuclear factor 2 (Nrf2) functioning, which is a redox-sensitive transcription factor. It was shown that when GSNO was exposed to human hepatocellular carcinoma cells (HepG2), the level of intracellular NO increased dose-dependently during incubation for 24 and 72 hours. The maximum increase of NO level at 100 mM concentration led to decrease of the amount of non-protein SH groups, to maximum increase of 3-nitrothyrosine and bityrosine levels, which contributed to the decline of cell viability. The NO donor — S-nitrosoglutation activated Nrf2 during exposure for 24 hours, most likely due to nitrosylation of Keap1 protein, and at 72 hours not only activated Nrf2, but also led to an increase in its amount. This process was carried out through NO-cGMP signaling pathway. Activation of Nrf2 is a key factor in protecting cells from the toxic effects of nitrosative stress products.
S-нитрозоглутатион (GSNO) является эндогенным донором оксида азота (NO), который, в свою очередь, может выступать как в качестве сигнальной молекулы, так и токсического агента, образуя активные формы азота (АФА). Целью данного исследования было изучение механизма участия NO в регуляции функционирования эритроидного ядерного фактора 2 (Nrf2), являющегося редокс-чувствительным транскрипционным фактором. Показано, что при воздействии GSNO на клетки линии гепатоцеллюлярной карциномы человека (HepG2) уровень внутриклеточного NO дозозависимо возрастал при инкубации в течение 24 и 72 ч. Максимальное увеличение уровня NO при концентрации 100 мкМ приводило к снижению уровня небелковых SH-групп, максимальному возрастанию уровня 3-нитротирозина и дитирозина, что способствовало снижению жизнеспособности клеток. Донор NO — S-нитрозоглутатион при экспозиции в течение 24 ч активировал Nrf2, скорее всего, за счет нитрозилирования белка Keap1, а при воздействии в течение 72 ч не только активировал Nrf2, но и приводил к повышению его количества. Этот процесс осуществлялся через NO-цГМФ-сигнальный путь. Активация Nrf2 является ключевым фактором в обеспечении защиты клеток от токсического воздействия продуктов нитрозативного стресса.