Применение оттискной цитологии в оценке иммунологических эффектов изолированного и комбинированного действия наночастиц селена и меди

Введение. Touch Imprint Cytology — метод оттискной цитологии мазков-отпечатков имеет большое диагностическое значение не только в клинической практике, а также представляет интерес и в качестве экспресс-метода оценки иммунологических эффектов влияния металлосодержащих наночастиц (Ме-НЧ) на ткани лабораторных животных в эксперименте.

Материалы и методы. Проанализированы селезёнка и брыжеечные лимфатические узлы (БЛУ) аутбредных крыс-самцов (24 особи, по 6 крыс в каждой группе, включая контроль), с начальной массой тела 220–230 г, после субхронической интоксикации, которая была вызвана многократными внутрибрюшинными инъекциями НЧ SeО в дозе 0,5 мг/кг и НЧ СuO в дозе 0,5 мг/кг и их комбинации 3 раза в неделю (всего 18 введений), диаметром (± стандартное отклонение) для НЧ SeO — 51 ± 14 нм, для НЧ CuO — 21 ± 4 нм. После умерщвления крыс декапитацией у животных из каждой группы извлекали селезёнку и БЛУ. С селезёнки и БЛУ делали оттиски на предметные стёкла. Использовали метод окрашивания по Лейшману. Цитоморфологические признаки изучали в световом бинокулярном микроскопе Carl Zeiss Primo Star с системой визуализации видеокамерой USCMOS при увеличении ×100 и ×1000 в соответствии с принятыми критериями. Подсчёт клеток при анализе препаратов селезёнки и БЛУ проводили в процентах – 100 клеток с каждого мазка (48 исследований), а также с расчётом числа клеточных элементов на 1 мм² площади поверхности мазка, путём подсчёта абсолютного количества каждого клеточного элемента на поле зрения микроскопа 0,03 мм², с последующим пересчётом на 1 мм² (количество исследований 48). Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью компьютерной программы Excel. Данные обрабатывали статистически с применением t-критерия Стьюдента. Различия сравниваемых результатов считали достоверными при достигнутом уровне значимости p < 0,05.

Результаты. Приведены основные результаты, полученные при изучении цитоморфологических показателей мазков-отпечатков селезёнки и БЛУ крыс после воздействия металлосодержащих наночастиц селена и меди как изолированно, так и их комбинации с применением двух методов подсчёта клеточного состава препаратов. Выделены основные изменения клеточного состава при формировании иммунологических эффектов. Выявлены воспалительные реакции гиперергического типа при воздействии наночастиц селена как при автономном воздействии, так и при комбинации с наночастицами меди. Отмечено формирование местного клеточного иммунитета за счёт увеличения уровня плазмоцитов в мазках-отпечатках при воздействии наночастиц меди.

Заключение. Применение оттискного метода мазков-отпечатков совместно с гистологическим исследованием тканевых препаратов позволяет дать наиболее полный анализ цитоморфологических показателей при исследовании иммунологических эффектов металлосодержащих наночастиц.

Участие авторов:

Бушуева Т.В. — концепция и дизайн исследования, написание текста;

Сахаутдинова Р.Р. — сбор и обработка материала, написание текста;

Рябова Ю.В. — сбор и обработка материала;

Панов В.Г. — статистическая обработка;

Сутункова М.П., Минингалиева И.А. — редактирование.

Все соавторы — утверждение окончательного варианта статьи, ответственность за целостность всех частей статьи.

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов в связи с публикацией данной статьи.

Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.

Заключение комитета по биомедицинской этике: исследования одобрены ЛЭК ФБУН ЕМНЦ ПОЗРПП, номер протокола № 2 от 20.04.2021 г.

Поступила: 06.10.2021/ Принята к печати: 25.11.2021 / Опубликована: 30.12.2021