Модульные нанотранспортеры, способные вызывать внутриклеточную деградацию N-белка вируса SARS-CoV-2 в клетках А549 с временной экспрессией этого белка, слитого с флуоресцентным белком mRuby3

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Созданы модульные нанотранспортеры (МНТ), содержащие антителоподобную молекулу, монободи, к N-белку вируса SARS-CoV-2, а также аминокислотную последовательность, привлекающую Е3-лигазу Keap1 (Е3BP). В данный МНТ также был введен сайт отщепления E3BP-монободи от МНТ в кислых эндоцитозных компартментах. Показано, что данное отщепление эндосомной протеазой катепсином В приводит к увеличению сродства E3BP-монободи к N-белку в 2.7 раза. На клетках А549 с временной экспрессией N-белка, слитого с флуоресцентным белком mRuby3, было показано, что инкубация с МНТ приводит к достоверному уменьшению флуоресценции mRuby3. Предполагается, что разработанные МНТ могут служить основой для создания новых противовирусных препаратов против вируса SARS-CoV-2.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Ю. В. Храмцов

Институт биологии гена Российской академии наук

Автор, ответственный за переписку.
Email: alsobolev@yandex.ru
Россия, Москва

А. В. Уласов

Институт биологии гена Российской академии наук

Email: alsobolev@yandex.ru
Россия, Москва

Т. Н. Лупанова

Институт биологии гена Российской академии наук

Email: alsobolev@yandex.ru
Россия, Москва

Г. П. Георгиев

Институт биологии гена Российской академии наук

Email: alsobolev@yandex.ru

академик

Россия, Москва

А. С. Соболев

Институт биологии гена Российской академии наук; Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова

Email: alsobolev@yandex.ru

член-корреспондент

Россия, Москва; Москва

Список литературы

  1. Clercq E.D., Li G. // Clin Microbiol Rev. 2016. V. 29. P. 695–747.
  2. Gebauer M., Skerra A. // Annu Rev Pharmacol Toxicol. 2020. V. 60. P. 391-415.
  3. Shipunova V.O., Deyev S.M. // Acta Naturae. 2022. V. 14. № 1(52). P. 54–72.
  4. Tolmachev V.M., Chernov V.I., Deyev S.M. // Russ Chem Rev. 2022. V. 91. № 3. RCR5034
  5. Surjit M., Lal S.K. // Infect Genet Evol. 2008. V. 8. P. 397–405.
  6. Wu C., Zheng M. // Preprints. 2020. 2020020247.
  7. Prajapat M., Sarma P., Shekhar N., et al. // Indian J Pharmacol. 2020. V. 52. P. 56.
  8. Du Y., Zhang T., Meng X., et al. // Preprints. 2020. doi: 10.21203/rs.3.rs-25828/v1.
  9. Khramtsov Y.V., Ulasov A.V., Lupanova T.N., et al. // Dokl Biochem Biophys. 2023. V. 510. P. 87–90.
  10. Lu M., Liu T., Jiao Q. et al. // Eur J Med Chem. 2018. V. 146. P. 251–259.
  11. Fulcher L.J., Hutchinson L.D., Macartney T.J., et al. // Open biology. 2017. V. 7. 170066.
  12. Slastnikova T.A., Rosenkranz A.A., Khramtsov Y.V., et al. // Drug Des Devel Ther. 2017. V. 11. P. 1315–1334.
  13. Khramtsov Y.V., Ulasov A.V., Lupanova T.N., et al. // Dokl Biochem Biophys. 2022. V. 506.
  14. Kern H.B., Srinivasan S., Convertine A.J., et al. // Mol Pharmaceutics. 2017. V. 14(5). P. 1450–1459.
  15. Wang S., Dai T., Qin Z., et al. // Nat. Cell Biol. 2021. V. 23. P. 718–732.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Зависимости относительной интенсивности флуоресценции (за 100% принята интенсивность флуоресценции до начала термофореза) через 20 с после начала термофореза от концентрации МНТ1 или расщепленного МНТ1 при постоянной концентрации N-белка, меченного AF488 (5 нМ). Указана стандартная ошибка определения относительной интенсивности флуоресценции (14–17 повторов).

Скачать (61KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Относительная флуоресценция клеток А549 (флуоресценция клеток, к которым не добавлялся МНТ была принята за 100%) при их инкубации различные времена с 500 нМ МНТ1 или 500 нМ МНТ0. Указаны средние значения с соответствующей среднеквадратичной ошибкой (n = 3–9).

Скачать (47KB)
Метаданные

© Российская академия наук, 2024